PCR analizi: bu nedir? PCR analizini nasıl alınır

O kadar uzun zaman önce insanlarda çeşitli bulaşıcı hastalıkların tanısı için güvenilir oldukça hassas ve hızlı bir yöntem geliştirilmemiştir. Bu tür bir yöntem "PCR analizi" olarak adlandırılır. Nedir, ne o mikroorganizmaları tanımlayabilir ve alınacağını, bu yazıda anlattığım şey, özünde.

keşif Tarihçesi

İlk olarak 1983 yılında bir Amerikan bilim Keri Myullis, patentli polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) icat teşhis etmenin yöntemi çalıştığı olan "Cetus Corporation," ile ve yaratıcısı. Ama 1992 yılında tüm hakları ve patentler şirkete satıldı "Hoffman-La Roche." Bundan sonra, benzer çalışmalar paralel olarak yürütülmüştür ve bu Elis Chen, David Edgar John HKD olarak diğer ABD biyologlar tarafından bildirilmiştir ortaya çıktı. 1980 yılında bu konuda ve Sovyet bilim adamları A. Slyusarenko A. Kaledin ve yapan S. Gorodetsky. Bu nedenle, tek telif hakkı sahibi mümkün olmamıştır belirlemek için. Bir çok üstün biyokimyagerler polimeraz reaksiyonu yöntemlerinin gelişmesine katkıda bulunmuş ve CERN yeniliklerini patentini almıştır. PCR'nin bu nokta analizi de özel donanımlı laboratuarlar boyunca gerçekleştirilir.

ÖZET PCR teşhis

PCR analizi: ne olduğunu ve nasıl çalışır? yönteminin özü, in vitro olarak özel bir enzim olan DNA polimeraz kullanarak ses spesifik mikrobiyal ortamında arttırmak için gerçeğinde yatar. Bu arda çarpma mevcut DNA materyali yapmak için. Bu durumda, bir numunede bir patojene varlığı miktarı biyokimyasal laboratuar çalışmaları pahasına artırılacak ve bakteriler mikroskop tespit etmek zor değildir.

malzemenin çalışma nasıl?

Gerekli analiz gerçekleştirmek için:

• DNA şablonu,;
• fragmanının uçları bağlantı primerleri malzeme;
• ısıya dayanıklı DNA polimeraz enzimi;
• kimyasal maddeler, enzimler düzgün çalışmasını temin etmek;
• Tampon çözelti DNA malzemesi büyüme ve gelişme için gerekli koşulları oluşturmak için gereklidir.

denatürasyon, tavlama ve uzatma PCR üç adımdan oluşan 25-30 tekrarlarını yapmaktadır gerçekleştirmek için.

özel bir alet kullanılarak polimezarnoy zincir reaksiyonu analiz etmek - cycler. Modern ekipman Eğer tanı sırasında hatalarla ortadan kaldırmak için gerekli ısıtma ve soğutma tüpleri programı yüklemek için izin verir.

Nerede tanı uygulamak için?

Polimezarnoy zincir reaksiyonu yöntemi, ilaç çeşitli alanlarda kullanılmaktadır:

• Adli kullanımı, örneğin saç, tükürük ya da kan gibi, genetik malzeme tespit etmek;
• kan PCR analizi, örneğin belirli bir ilaca bireysel genetik dikilmiş tepkisinin saptanması için, genotipleme için yardımcı olur;
• insanlar arasında bir yöntem set aile bağları ile;
• en çok aranan PCR yöntemi, çeşitli bulaşıcı hastalıkların belirlenmesi için tıbbi tanı haline gelmiştir.

Ne enfeksiyonları PCR ortaya çıkarır?

Bu nedenle, tıp uzun başarılı bir PCR analizi kullanılmıştır. Nedir, biz zaten biliyoruz. Ve bazı patojenler onunla tespit edilebilir? PCR aşağıdaki teşhis enfeksiyonları :

• hepatit A, B, C,;
• ureaplasmosis;
• kandidiyazis;
• chlamydia;
• mycoplasmosis;
• Bakteriyel vajinoz;
• bulaşıcı mononükleoz,
• trikomonas;
• HPV enfeksiyonu;
• tüberküloz;
• 1. ve 2. tip herpes enfeksiyonu;
• Helicobacter pylori enfeksiyonu;
• sitomegalovirüs;
• difteri;
• salmonelloz;
• HIV enfeksiyonu.

Aynı zamanda, PCR yöntemleri kanserinin teşhisi kullanılır.

yöntemin avantajları

Teşhis PCR birçok avantajı vardır:

1. Yüksek duyarlılık. Hatta sadece birkaç DNA molekülleri mikroorganizma ile PCR analizi enfeksiyonunun varlığını belirler. Kronik ve latent hastalıkların ortaya çıkma yöntemi sağlar. Genellikle bu gibi durumlarda, mikroorganizma başka yollarla işlenmemiştir.
2. örneğin tükürük, kan, cinsiyet seçimi, saç, epitel hücreleri gibi herhangi bir uygun malzeme araştırmak için. En yaygın bir kan testi ve ürogenital çubuk PCR'dir.

3. genişletilmiş büyüyen kültürleri gerektirmez. teşhis otomatik işlem 4-5 saat sonra bir çalışmanın sonuçlarını almasına izin verir.
4. yöntem neredeyse tamamen özgün. yanlış negatif sonucun sadece izole vaka kaydedildi.
5. bir numune materyalinde patojenlerin çeşitli tanımlayabilme. Bu hastalığın tanısında sürecini hızlandırır, aynı zamanda önemli ölçüde maddi giderlerini azaltır. Çoğu zaman, doktor PCR kapsamlı bir analizini öngörür. Fiyat araştırması, altı patojenleri belirlemek oluşan yaklaşık 1.500 ruble olduğunu.

analiz için hazırlanması Öneriler

Sonuçlar PCR çalışmaları tanı için ön hazırlıkların önerileri aşağıdaki test edilecek ihtiyaç geçerli olabilmesi için:

1. tükürüğün tesliminden önce malzemeyi örnekleme önce 4 saat boyunca yeme ve ilaç kaçınmalıdır. Hemen işlem öncesi, haşlanmış su ile ağzınızı çalkalayın.
2. yanağın iç numune alma yukarıda kuralları destekli ve gerekmektedir. duruladıktan sonra prostat salgıları serbest bırakmak için ciltte hafif bir masaj yapılması tavsiye edilir.
3. İdrar genellikle evde toplanır. Bunu yapmak için, genital kapsamlı bir tuvalet yapmak gerekir. Steril bir plastik kap içinde idrar 50-60 ml toplamak için gereklidir. kadınlar vajina içine tampon eklemek için, ve mümkün olduğunca erkek cilt malzemenin saflığını sağlamak için kat çekme etmesi önerilir. Sen regl sırasında malzemeyi alamaz.
4. Spermin teslimatı için önce malzemenin koleksiyonuna 3 gün esnasında cinsel ilişkiden kaçınmaları. Ayrıca, doktorlar sauna ve sıcak banyo, alkol ve baharatlı gıdalar kullanımını terk etmeleri önerilir. 3 saat için analizden önce idrar kaçınmaya gereklidir.
5. Bir Chlamydia PCR ile analiz, kadınların ve erkeklerin her ikisi 3 gün cinsel dinlenme önerilir eğer, örneğin, ürogenital smear geçirin. analizinden önce 2 hafta antibiyotik alamaz. Bir hafta boyunca sen mahrem jeller, merhem, vajinal fitiller, douching kullanarak durdurmak gerekir. Etüdün başlamasından önce 3 saat idrar kaçınmalıdır. âdet çit malzemesi yürütülen değil esnasında, sadece 3 gün lekelenme sona ermesinden sonra ürogenital smear alabilir.

Hamilelik sırasında PCR

Bir bebek için bekleme süresi, pek çok bulaşıcı hastalıklar, cinsel yolla bulaşan hastalıklar, Normal fetal gelişim için son derece tehlikelidir. Cinsel yolla bulaşan hastalıklar intrauterin gelişimi, düşük veya erken doğum, çocuğun konjenital malformasyonlar tetikleyebilir. Nedenle, PCR tarama erken gebelikte almak önemlidir. 12 haftaya kadar - kaydederken analizi gereklidir geçirin.

Duvarların madde özel bir fırça ile servikal kanaldan gelir. olarak ağrısızdır ve bebeğe bir tehlike oluşturmuyor. Normal olarak, Chlamydia PCR yöntemi, hem de ureaplasmosis, mycoplasmosis, sitomegalovirüs, herpes, papillom virüsü için analiz gebelik sırasında. PCR, 6 olarak adlandırılan bu tür inceleme kompleksi.

HIV teşhisi için PCR

Nedeniyle, polimeraz zincir reaksiyonu gibi bir yöntem gövdesinde değişiklikler ve tanı koşullarına karşı çok hassas olması nedeniyle, birçok faktör sonucunu etkileyebilir. % 96-98 - HIV enfeksiyonu için nedenle PCR analizi güvenilir bir yöntem, verimliliği değildir. Testin kalan% 2-4 yanlış pozitif sonuçlar verir.

Ama HIV PCR tanı olmadan bazı durumlarda yapamaz. Genellikle, yanlış negatif ELISA ile insanlara taşınır. Bu rakamlar kişi henüz virüse karşı antikorlar geliştirmiş değil ve çoklu sayısını artırmadan tespit edilemez olduğunu göstermektedir. Bu kan testi PCR yöntemi gerçekleştirilerek elde edilebilir.

Ayrıca çocukların tanı yaşamın ilk yılı, HIV pozitif anneden doğan bir ihtiyaç. yöntem güvenilir çocuğun durumunu belirlemek için tek yoldur.

hepatit teşhisi için PCR

Polimeraz zincir reaksiyonu yöntemi, de enfeksiyon veya semptomların başlamasından antikorların oluşturulmasından önce, hepatit A, B, C, virüsün DNA tespit edilmesine olanak sağlar. Bu gibi bir hastalık% 85 asemptomatiktir ve uygun bir şekilde tedavi olmaksızın kronik bir hale gelir Özellikle etkili hepatit C PCR analizi vardır.

patojenin zamanında tespit komplikasyonlar ve uzun süreli tedavi önlemeye yardımcı olur.

Entegre PCR taraması

Kapsamlı PCR Analizi: bu nedir? Bu , aynı anda birkaç tür enfeksiyon belirlenmesini içeren bir tarama yöntemidir polimezarnoy zincir reaksiyonu: Mikoplazma genitalyum, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis kandida, trikomonas, sitomegalovirüs, Ureaplasma urealitikum, herpes 1. ve 2. tür, gonore papilloma virüsü. Bu tanı fiyatı 2.000 ila 3.500 ruble arasında değişir. kalitatif ya da kantitatif: aynı zamanda analiz türüne, klinik, malzeme ve teçhizat ile ilgili olarak. sizin durumunuzda ne ihtiyaç vardır - doktor karar verir. Bazı durumlarda, sadece basitçe HIV, nicel titreye oynadığı önemli role gibi diğerlerinde patojenin varlığını tespit. Yukarıdaki patojenler inceleme tüm tanısında 12 "PCR analizi" olarak da adlandırılır.

analiz sonuçlarını Deşifre

Transkripsiyon PCR analizi basittir. Sadece 2 endeks ölçekli vardır - "negatif" "olumlu" ve patojenin tespit edilmesi üzerine% 99 güvenle doktorlar hastalığının varlığını doğrulamak ıncı ve hastanın tedaviye başlamak için. tespit edilen bakterilerin karşılık gelen bir kolon dizin numarası enfeksiyonun saptanması kantitatif yöntemde belirtilecektir. Sadece bir doktor hastalığın yaygınlığını saptamak ve gerekli tedaviyi reçete edebilir.

Bazı durumlarda, olumsuz sonuçla, PCR ile HIV enfeksiyonu belirlemede örneğin, ek araştırmalar bu rakamları teyit etmek için bir ihtiyaç vardır.

Nerede test yaptırmaktan?

Kamu kliniğine veya özel bir laboratuarda analiz-PCR geçmesine Nerede? Ne yazık ki, belediye sağlık kurumları teçhizat ve yöntemlerde genellikle güncelliğini yitirmiş durumda. Nedenle, modern ekipman ve kalifiye personel ile özel laboratuvarlara tercih vermek daha iyidir. Buna ek olarak, özel bir klinikte size çok daha hızlı sonuç almak.

Moskova, birçok özel laboratuarlar çeşitli enfeksiyonlar için PCR analizini sunuyoruz. Örneğin, "Vita", "Entegre Klinik," "Mutlu Aile gibi kliniklerde", "Üro-Pro", PCR analizini gerçekleştirdi. Anket fiyat 200 ruble olduğunu. Bir patojenin belirlenmesi için.

Çoğu durumda PCR ile bulaşıcı hastalıkların tanı enfeksiyonunun erken safhalarında vücutta patojen daha hızlı tespit etmek ve güvenilir bir yoldur sonucuna varılabilir. Oysa bazı durumlarda, tanı diğer yöntemlerini seçmek. Sadece bir uzman olabilir, böyle bir çalışmanın gerekliliğini belirleyin. PCR analizi Şifre çözme da profesyonel bir yaklaşım gerektirir. Doktorunuzun tavsiyelerine uyun ve gerekli olmayan kendi testlerini, vermeyin.